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赭曲霉毒素ELISA檢測試劑盒 產品名稱：赭曲霉毒素試劑盒 產品概述：赭曲霉毒素A是由曲霉菌和青霉屬菌株產生的一種有毒真菌次級代謝產物，廣泛存在于谷物及谷物產品、香料和咖啡豆等產品中。赭曲霉毒素A具有很強的肝臟和腎臟毒性，并有致畸、致突變和致癌作用，嚴重危害人類健康。赭曲霉毒素一般用薄層色譜、高效液相色譜法檢測,但因其操作繁雜、費用昂貴而影響實際應用。而使用赭曲霉毒素ELISA試劑盒則能夠快速而準確的分析樣品中赭曲霉殘留。 適用范圍 赭曲霉檢測試劑盒可定性、定量檢測谷物、飼料、面粉、啤酒、紅酒、飲料等樣本中的赭曲霉毒素。 試驗原理 赭曲霉毒素試劑盒采用競爭ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被赭曲霉毒素A抗原，加入樣本及辣根過氧化物酶標記的赭曲霉毒素A 抗體。樣本或標準溶液中的赭曲霉毒素A與預包被在微孔板上的赭曲霉毒素A抗原競爭結合辣根過氧化物酶標記的赭曲霉毒素A 抗體，與樣本或標準溶液中的赭曲霉毒素A結合的酶標抗體在洗滌時被除去，再加入顯色液，讀取吸光度值。樣本的吸光值與其所含殘留物赭曲霉毒素A抗原的含量成負相關。對照標準曲線，即可得出相應殘留物赭曲霉毒素A的含量。 試劑配制 1、將赭曲霉毒素試劑盒取出放置在室溫中，使試劑盒回溫至室溫（20～25℃）。 2、 樣品稀釋液：用去離子水將濃縮樣品稀釋液按1:9體積比進行稀釋（1份濃縮樣品稀釋液+9份去離子水）。2－8℃保存三個月。用前混勻。 3、 10倍稀釋洗滌工作液：用去離子水將濃縮洗滌液按1:9體積比進行稀釋（1份濃縮洗滌液+9份去離子水），2－8℃保存三個月。用前混勻。 操作步驟 1、將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。 2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷凍。 3、洗滌工作液在使用前也需回溫。 4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。 5、加標準品/樣本：加標準品/樣本50ul/孔到對應的微孔中，再加入酶標物50ul/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環境中反應15min。 6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌工作液300ul/孔，充分洗滌5次，每次間隔30s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。 7、顯色：加入底物液100ul/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環境反應15min。 8、測定：加入終止液50ul/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處測定每孔OD值。 注意事項 1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的OD值偏低。 2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會出現標準曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。 3、每加一種試劑前需將其搖勻。 4、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。 5、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。 6、儲存條件 保存赭曲霉毒素試劑盒于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。 7、試劑變質的跡象 發色試劑有任何顏色表明發色劑變質，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質。 8、赭曲霉毒素試劑盒*反應溫度為25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。 試劑盒組成 1、96孔酶標板×1塊 2、標準液×6瓶：（1ml/瓶） 0ppb, 1ppb, 2ppb, 6ppb, 18ppb,54ppb 3、酶標物 1瓶 …………………………………………… 6ml 4、顯色液1瓶 ……………………………………… 12ml 5、終止液 ………………………………………6ml 6、濃縮洗滌液 （10×） ………………………………… 40ml 7、濃縮樣品稀釋液（10×） ……………………………… 20ml 8、操作說明書 貯藏條件及保存期 貯藏條件：保存試劑盒于2～8℃。 保存期：赭曲霉毒素試劑盒有效期為12個月。 如果您有技術上的問題也可以打電話咨詢我們，我們有自己獨立的精良的實驗室，屆時將竭誠為您服務。 |
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