酶法分析技術(shù)在食品行業(yè)的應(yīng)用

目前，酶法分析技術(shù)已經(jīng)在我國被廣泛應(yīng)用，如在蔬菜、食品、果汁、乳業(yè)、酒業(yè)、糖業(yè)、飼料、發(fā)酵、制藥、調(diào)味品等加工生產(chǎn)中作為產(chǎn)品質(zhì)量控制、成品質(zhì)量檢驗(yàn)及加工、制藥等工藝工程研究分析的主要手段，藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)中作為產(chǎn)品質(zhì)量控制和生產(chǎn)過程監(jiān)控的手段。這主要是因?yàn)樗兄僮骱唵?，快速?zhǔn)確，特異性強(qiáng)，能夠定量分析檢測(cè)的顯著特點(diǎn)，得到世界很多國家的認(rèn)可，并且被多個(gè)國家寫入法規(guī)。

隨著科學(xué)技術(shù)日新月異的發(fā)展，目前市場(chǎng)上推出了一種液體裝即用型酶法分析試劑盒，與以往的干粉酶法試劑盒相比，這種試劑盒有著以下顯著的特點(diǎn)：一是所有試劑均為液體劑型，即時(shí)可用，不需溶解和配制，克服了上一代普通干粉裝試劑盒的一些缺點(diǎn)：如部分試劑（如酶或NADP）是凍干粉，使用前要先溶解，使用后要冷凍保存，尤其是保質(zhì)期僅為2－3個(gè)月，每次檢測(cè)樣品前要先融化，這樣不僅降低酶的活性，而且影響酶促反應(yīng)和檢測(cè)準(zhǔn)確度；推出新一代的液體裝即用型試劑盒不存在這些問題，而且核心的酶也是液體型的，不需冷凍保存，可直接使用，保質(zhì)期達(dá)到12月以上，檢測(cè)的穩(wěn)定性和重復(fù)性大大提高，三是液體裝即用型試劑盒可以采用儀器進(jìn)行自動(dòng)化檢測(cè)，有效減少試劑用量，增加測(cè)試數(shù)，成倍降低檢測(cè)成本。以上特點(diǎn)，便使液體裝酶法分析試劑盒取代普通干粉試劑盒有著不可逆轉(zhuǎn)的優(yōu)勢(shì)。

隨著酶法應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)化，酶法分析在國際貿(mào)易中變得尤為重要。而在我國，目前標(biāo)準(zhǔn)水平總體來說偏低，所以我們有必要去借鑒國際上已經(jīng)成熟的標(biāo)準(zhǔn)體系?！顿Q(mào)易技術(shù)壁壘協(xié)議》明確規(guī)定：一切需要有技術(shù)規(guī)則或標(biāo)準(zhǔn)的地方，締約方均應(yīng)以這些國際的技術(shù)規(guī)則或標(biāo)準(zhǔn)作為制訂本國技術(shù)規(guī)則或標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)。這也是我們出口商品的需要。

在以下的國際標(biāo)準(zhǔn)及法規(guī)中，大量的酶法檢測(cè)方法被采用和推廣：
ISO ( 國際標(biāo)準(zhǔn)組織)

AOAC (美國化學(xué)分析聯(lián)合會(huì))

AOAC Official 牛奶中乳糖的測(cè)定 Method 984.15 (酶法)  

AOAC Official 酒中葡萄糖及果糖的測(cè)定 Method 985.09(酶法)

AOAC Official 酒中檸檬酸測(cè)定 Method 985.11 (酶法)    

AOAC Official 蘋果酸中L-蘋果酸比例的測(cè)定 Method 993.05 (酶法)

IFU (國際果汁生產(chǎn)者協(xié)會(huì))

IFU 21 L-蘋果酸的測(cè)定 (酶法), 1985  

IFU 22 L-檸檬酸的測(cè)定 (酶法), 1985  

IFU 22 乙醇的測(cè)定型 (酶法) 1996

IFU 53 D/L-乳酸的測(cè)定 (酶法),1996  

IFU 54 D-異檸檬酸的測(cè)定 (酶法),1984  

IFU 55 葡萄糖的測(cè)定 (酶法), 1985

IFU 55 果糖的測(cè)定 (酶法), 1985  

IFU 56 蔗糖的測(cè)定 (酶法), 1998  

IFU 62 山梨醇的測(cè)定 (酶法),1995

IFU 64 D-蘋果酸的測(cè)定 (酶法),1995  

IFU 66 乙酸的測(cè)定 (酶法),1996  

IFU 76 葡萄汁中D-葡萄糖酸的測(cè)定,2001

IFU 77 葡萄汁中甘油的測(cè)定,2001 starch enzymatic recommended

OIV (國際酒業(yè)協(xié)會(huì))

葡萄糖及果糖的測(cè)定(酶法)  

甘油的測(cè)定 (酶法)

L-/D-乳酸的測(cè)定 (酶法)

檸檬酸的測(cè)定 (酶法)

L-蘋果酸的測(cè)定 (酶法)

D-蘋果酸的測(cè)定 (酶法)

IDF (國際乳品委員會(huì))

IDF 34C(1992) 乳酪,乳酪加工品及牛奶中檸檬酸的測(cè)定(酶法)    

IDF 69B(1987) 無水牛奶中D-/L-乳酸的測(cè)定(酶法)

IDF 79B(1991) 乳酪加工品,乳清粉中乳糖及D-半乳糖的測(cè)定(酶法)  

IDF 79B(1991) 無水牛奶,無水冰淇淋混和物有乳清粉中乳糖及D-葡萄糖的測(cè)定(酶法)

IDF 97A(1984) 牛奶制品及乳清粉中硝酸鹽/(硝酸根)的測(cè)定(酶法)    

IDF 175(1995) 牛奶中乳糖/D-葡萄糖的測(cè)定(酶法)

EBC (歐洲啤酒釀造公約)

低酒精度啤酒及無酒精度啤酒中乙醇的測(cè)定(酶法)  

啤酒中硝酸鹽的測(cè)定(酶法)  

啤酒中總二氧化硫的測(cè)定(酶法)

啤酒中乙酸的測(cè)定(酶法)

啤酒中甘油的測(cè)定 (酶法)

啤酒中乳酸的測(cè)定 (酶法)

MEBAK (Mitteleuropaische Brautechnische Analysenkommission-Central European Brewing Committee for Analysis)

ASBC Methods of Analysis (American Societ of Brewing Chemists)

低酒精度啤酒的檢測(cè)(酶法) (國際方法)—頒布日期 1991年

ICUMSA (國際糖制品標(biāo)準(zhǔn)方法委員會(huì))

ICUMSA method GS 2/3-35 精制糖制品中亞硫酸鹽的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS 8/1/2/3/4-19 總α-半乳糖酶及蜜三糖的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS 8/4/6-4 甜菜汁中葡萄糖及果糖的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS8/4/6-13 乳酸的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS8/4/6-14 甜菜汁中乙酸的測(cè)定(酶法)

European Norms (歐盟成員國均執(zhí)行此標(biāo)準(zhǔn))

EN 1137 (1995) 水果汁及蔬菜汁中檸檬酸(鹽)含量的測(cè)定:NADH 分光光度法

EN 1138 (1995) 水果汁及蔬菜汁中L-蘋果酸(鹽)含量的測(cè)定: NADH 分光光度法

EN 1139 (1994) 水果汁及蔬菜汁中D-異檸檬酸含量的測(cè)定: NADH 分光光度法

EN 1140 (1995) 水果汁及蔬菜汁中D-果糖含量的測(cè)定: NADH 分光光度法

EN 1988 (1998) 亞硫酸鹽的測(cè)定 (酶法)

EN-ISO 8069(2001) 無水牛奶中乳酸及乳酸鹽含量的測(cè)定  

EN-ISO11213(1995) 改良淀粉中乙酰基含量的測(cè)定(酶法)

EN 12014-3(1998) 肉制品中硝酸鹽及/或亞硝酸鹽含量的測(cè)定(用酶還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,而后用分

光光度計(jì)檢測(cè))

EN 12014-5(1998) 含蔬菜的嬰幼兒食品中硝酸鹽及/或亞硝酸鹽含量的測(cè)定(酶法)

EN 12138 (1998) 水果及蔬菜汁中D-蘋果酸含量的測(cè)定NAD 分光光度法.

EN 12146 (1997) 水果及蔬菜汁中蔗糖含量的測(cè)定NADP 分光光度法

EN 12631 (1999) 水果及蔬菜汁中D-乳酸及L-乳酸(鹽)含量的測(cè)定NAD 分光光度法

EN 12632 (1999) 水果及蔬菜汁中乙酸(鹽)含量的測(cè)定NAD 分光光度法.    

EN -ISO13965 肉及肉制品中淀粉及葡萄糖含量的測(cè)定(酶法)

DIN (German Norms - additional not covered by EN)

DIN 10325 (1986) 乳酪制品中檸檬酸的測(cè)定(酶法)    

DIN 10326 (1986) 牛奶及牛奶制品中蔗糖及葡萄糖的測(cè)定(酶法)

DIN 10344 (1982) 牛奶及牛奶制品中乳糖及半乳糖的測(cè)定(酶法)  

DIN 10335 (1987) 牛奶及牛奶制品中D-/L-乳酸的測(cè)定(酶法)

DIN 10381 (1979) 淀粉及淀粉制品中D-葡萄糖及D-果糖的測(cè)定(酶法)  

DIN 10471 (1997) 牛奶及牛奶制品中D-葡萄糖酸的測(cè)定(酶法)

DIN 10476 (2000) 牛奶制品中硝酸鹽及亞硝酸鹽的測(cè)定(酶法)    

DIN 54604-1 (1988) 紙及紙板中淀粉的測(cè)定(酶法)  

涉及的檢測(cè)樣品種類包括各類蔬菜、水果及加工品、啤酒、白酒、葡萄酒及其他飲料；各種糕點(diǎn)、面包類食品、巧克力、各種糖、肉食及各類加工發(fā)酵食品；各類奶及奶制品、蜂蜜、調(diào)味品、發(fā)酵產(chǎn)品及其他生物樣品、動(dòng)物飼料等等。具體項(xiàng)目包括L-乳酸、D-乳酸、D/L-乳酸、乙酸、L-抗壞血酸、L-谷氨酸、D-蘋果酸、L-蘋果酸、異檸檬酸、檸檬酸、乙醇、尿素/氨、膽固醇、β-羥丁酸、葡萄糖酸、葡萄糖/果糖、蔗糖/葡萄糖/果糖、葡萄糖、乳糖/半乳糖、麥芽糖、甘油、淀粉、L-肉堿、甘露醇、丙酮酸、酮體、可溶性纖維、游離SO2、鐵、銅、總SO2和亞硫酸鹽等物質(zhì)等。

已經(jīng)應(yīng)用的產(chǎn)品包括：

此外，在葡萄酒行業(yè)相當(dāng)發(fā)達(dá)的歐洲，葡萄酒的檢測(cè)也是經(jīng)常用到的。法國柏桑特公司就這方面專門組織研發(fā)力量研制出了葡萄酒專用檢測(cè)試劑盒（包括蘋果酸、乳酸、葡萄糖/果糖、酒石酸），并且在法國本地葡萄酒行業(yè)的生產(chǎn)和質(zhì)控已被廣泛采用，有效提高了葡萄酒加工生產(chǎn)中產(chǎn)品質(zhì)量控制、成品質(zhì)量檢驗(yàn)和蘋乳發(fā)酵過程中酸的監(jiān)測(cè)效率。尤其是重復(fù)使用這類檢測(cè)試劑盒在這些不同的生產(chǎn)過程中可確保符合成本效益的生產(chǎn)高品質(zhì)的產(chǎn)品。在我國，酒類行業(yè)檢測(cè)還相當(dāng)落后，各個(gè)關(guān)鍵過程及控制點(diǎn)的控制不嚴(yán)格，在加上我國的標(biāo)準(zhǔn)混亂，致使我國酒業(yè)很難與國際接軌。為了促進(jìn)我國葡萄酒健康發(fā)展，幫助企業(yè)建立生產(chǎn)過程監(jiān)控體系，北京泰樂祺科技優(yōu)先公司引進(jìn)了法國柏桑特(BioSenTec) 公司研發(fā)的葡萄酒專用酶法分析試劑盒，為國內(nèi)葡萄酒生產(chǎn)企業(yè)在蘋乳發(fā)酵等生產(chǎn)葡萄酒過程提供新的監(jiān)控手段。該產(chǎn)品均為全液體裝即用型產(chǎn)品，值得一提的是該品不僅適用于快速檢測(cè)葡萄酒、果汁有機(jī)酸、糖類物質(zhì)的含量，還可用于果汁生產(chǎn)中的檢測(cè)，適合于手動(dòng)和自動(dòng)化使用。

以下是此次引進(jìn)產(chǎn)品列表：

在過去很長的一段時(shí)間里，由于我國的技術(shù)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)過低，實(shí)驗(yàn)技術(shù)相對(duì)落后，一方面，已成為制約我國產(chǎn)品出口的瓶頸。由于技術(shù)壁壘的提高，我國出口企業(yè)不同程度遭遇國外技術(shù)壁壘的限制。受國外技術(shù)性貿(mào)易措施影響較大的農(nóng)、食行業(yè)損失嚴(yán)重。近年來美國、日本和歐盟等國家和地區(qū)不斷制定更嚴(yán)格和更廣泛的標(biāo)準(zhǔn)，我國農(nóng)產(chǎn)品對(duì)這些國家的出口難度在加大。另一方面，由于我國相當(dāng)一部分農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)低于國際標(biāo)準(zhǔn)，有的甚至沒有具體的技術(shù)要求，在對(duì)進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，只進(jìn)行極為普通的一般項(xiàng)目衛(wèi)生檢驗(yàn)，其他國家不合格的產(chǎn)品因符合我國的標(biāo)準(zhǔn)就可以堂而皇之地進(jìn)入中國市場(chǎng)，很難起到有效保護(hù)國內(nèi)產(chǎn)業(yè)的作用。

他山之石，可以攻玉。隨著全球經(jīng)濟(jì)一體化進(jìn)程的加快，我們更應(yīng)借鑒發(fā)達(dá)國家先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，制定和應(yīng)用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，盡快建立起完備的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)體系，筑起保護(hù)市場(chǎng)和消費(fèi)者利益的“質(zhì)量長城"。